< Tests
ما هو اختبار خط الأساس إذا كنت مصابة بالسارس- CoV-2؟
نص تم تحديثه 2020-04-30
لمعرفة ما إذا كنت مصابا بفيروس كورونا، يمكننا البحث عن وجود مواد وراثية خاصة بهذا الفيروس. ويستند الاختبار القياسي الذي قامت منظمة الصحة العالمية بالتصديق عليه إلى طريقة RT-qPCR للكشف عن التسلسل الجيني لفيروس سارس- COV-2. الاختبار المرجعي من قبل PCR هو: 1) أن يتم في وقت مبكر للحد من السلبيات كاذبة، 2) القيام بغض النظر عن شدة الأعراض - وهذا يعكس استراتيجية الصحة العامة وليس الفردية، 3) إذا كان الافتراض السريرية قوية، فمن المستحسن لعزل نفسك حتى لو كان الاختبار سلبيا. وظهرت الآن اختبارات أخرى للفحص. انظر السؤال "ما هي النهج التي يمكن أن تسرع من الفحص على نطاق واسع؟"
وينبغي التمييز بين اختبارات الكشف عن الفيروس وعينات البلعوم الأنفي التي تحدد ما إذا كان الشخص مصاباً حالياً بالفيروس (انظر "ما هو الاختبار الأساسي لمعرفة ما إذا كنت مصاباً بالسارس-COV-2؟"). الاختبارات المصلية التي تبين أننا قد أصيبنا بالفيروس عن طريق الكشف عن استجابتنا المناعية في الدم (انظر "ما هي الاختبارات لمعرفة ما إذا كان لدي أي وقت مضى الكوفيد-١٩ ? »).
يمكن أن تكون اختبارات الكشف عن الفيروسات حساسة للغاية من خلال عملية تضخيم الفيروسات (وهي طريقة كلاسيكية تعرف باسم عكس نسخة كمية PCR أو "RT-qPCR" أو طريقة حديثة لـ ASEthermal isothermal أو "RT-LAMP") وهي أقل حساسية إذا تم اكتشاف الفيروس دون تضخيم (هذه هي الاختبارات المسماة "antigenic").
متى يتم اختبار الفيروس؟ يشير اختبار PCR إلى وجود مواد فيروسية فقط أثناء العدوى. الشخص الذي أصيب في الماضي وتعافى بعد ذلك سيكون سلبيا لاختبار RT-qPCR في بعض الأحيان عدة أيام أو حتى أسابيع بعد الأعراض. من ناحية أخرى ، يمكن أن تصبح إيجابية للاختبار المصلي الذي يظهر وجود أجسام مضادة ضد الفيروس. كيفية تحديد حالة مؤكدة الكوفيد-١٩ وتحديد حالات الاتصال؟ إذا كانت هناك أعراض، يجب إجراء اختبار RT-qPCR في وقت مبكر، بغض النظر عن الخطورة. إذا لم تكن هناك أعراض: فمن المستحسن الانتظار حوالي 5-7 أيام بعد ملامسة الشخص المصاب. انظر السؤال "كم يوما عليك الانتظار بعد الاتصال للحصول على اختبار COVID؟"
ما الذي يؤخذ للكشف عن الفيروس؟ عادة ما يتم إجراء الاختبارات المرجعية الحالية على عينات البلعوم الأنفي باستخدام مسحة تم إدخالها في عمق الممرات الأنفية. ومع ذلك، يحتوي البلغم اللعابي على الكثير من الجسيمات الفيروسية ولأن العينة مكتفية ذاتياً ومنخفضة الخطورة، فإنها تستخدم في عدة بلدان مثل اليابان أو الولايات المتحدة. أذن في نهاية أيلول /سبتمبر من قبل الهيئة الصحية العليا لمرضى الأعراض فقط، وهذه الطريقة لأخذ العينات للأسف لم تنشر بشكل روتيني بعد في فرنسا.
ما هي التقنية التي هي أساس الفحص ل الكوفيد-١٩ ? وتستند الاختبارات المرجعية إلى تقنية PCR للكشف عن المواد الوراثية للفيروس، والتي تعرف في المصطلحات باسم "RT-qPCR".
ما هي الخطوات اللازمة للكشف عن الفيروس؟ تبدأ معالجة العينات، سواء كانت البلعوم الأنفي أو عن طريق الفم، مع تعطيل الفيروس، قبل استخراج المواد الوراثية للفيروس، RNA. ثم، لتحليل اللعاب، يجب أن تكون العينات مائعة. وفي فرنسا، يستند البروتوكول المرجعي للكشف عن الحمض النووي الريبي للفيروس إلى تضخيم من نوع RT-qPCR في مرحلة واحدة تم تطويره في المركز المرجعي الوطني لمعهد باستور ومنظمة الصحة العالمية. ويستهدف التضخيم RT-qPCR منطقتين محددتين من الفيروس وبالنسبة لبعض الاختبارات، وهي منطقة جينومية خاصة بالخلايا المريضة. هذا التسلسل البشري التحقق من صحة كل من أصل العينة، ونوعية العينات وتطبيع لهم فيما يتعلق ببعضها البعض. وهذا يتجنب الأخطاء "السلبية الكاذبة" بسبب فرض ضريبة سيئة. يسمح نطاق قياسي من الحمض النووي الريبي الفيروسي الاصطناعية عدد جزيئات الرنا سارس-CoV-2 يمكن قياسها كميا في العينات. ومع ذلك، نادرا ما يتم استخدامه وتقديم النتائج لا يسمح لمعرفة الحمل الفيروسي الفعلي. يستمر هذا البروتوكول على الأقل من 3 إلى 4 ساعات بين بدء معالجة العينات والحصول على نتيجة الاختبار في المختبر.
من أين تأتي السلبيات الزائفة؟ إذا تم أخذ العينة بشكل غير صحيح، قد تكون نتيجة الاختبار سلبية أثناء إصابة الشخص: هذه الأخطاء هي "سلبيات كاذبة". يمكن أن يحدث هذا إذا لم يتم إجراء العينة بشكل صحيح، ولكن أيضا في بعض الأحيان مع عينة جيدة. في الواقع ، في بعض المرضى الكوفيد-١٩ ، لا يتم الكشف عن الفيروس في إفرازات الأنف أو البلعوم أثناء اكتشافه في سائل الرئتين. الأسباب المتعددة التي تؤدي إلى السلبيات كاذبة تشير إلى أن هناك حاجة إلى احتياطات كبيرة. حتى لو كان الاختبار سلبياً، فقد تكون هناك علامات سريرية قد تؤدي إلى الاشتباه في الكوفيد-١٩ وفرض العزلة قبل إجراء مزيد من الاختبارات.
المصادر
تكشف أول حركية لكمية SARS-CoV-2 في مرضى المستشفيات في ميونيخ، ألمانيا (1 أبريل 2020) أن الجسيمات الفيروسية المعدية معزولة بسهولة عن عينات من الحلق أو الرئتين، ولكن ليس من البراز - على الرغم من ارتفاع مستويات الحمض النووي الريبي الفيروسي. تحليل عينات الدم والبول لم يكشف عن فيروس.
Wölfel, R., Corman, V. M., Guggemos, W., Seilmaier, M., Zange, S., Müller, M. A., ... & Hoelscher, M. (2020). Virological assessment of hospitalized patients with COVID-2019. Nature, 1-10.تحليل انتقال الكوفيد-١٩ يكشف أن العديد من العدوى تحدث قبل أو في بداية الأعراض، أن فترة الحضانة قصيرة، وأن العديد من اختبارات PCR قد أسفرت عن سلبيات كاذبة عندما لا يتم الكشف عن شخص مصاب.
بومر، م.M، بوشولز، يو، كورمان، ف.M، هوش، م. وكاتز، ك. ماروسيفيتش، د. ف.، بوهم، س.، وودنبرغ، ت. ، أكرمان، ن.، كونراد، ر. ، إيبرل، يو، تريسي، ب. ، دانغل، أ. ، بنغز، ك. ، فينجرل، ف. ، بيرغر، أ. ، هورمانسدورفر، س. ، إيبيش، س. ، ويكلين، ب. ، غرال، أ. ... زاب، أ. (2020). التحقيق في الكوفيد-١٩ تفشي في ألمانيا الناجمة عن حالة رئيسية واحدة مرتبطة بالسفر: سلسلة حالات. "لانسيت" الأمراض المعدية، 20(8)، 920-928.15- ويبين تحليل يقارن بين نتائج أكثر من 50 مختبراً في النمسا من نفس عينات الفيروسات المعطلة أنه في حين أن نتائج الاختبار المرجعي لل PCR تتسق مع العينات التي يكون فيها الفيروس موجوداً بكميات كبيرة، فإن هذا ليس هو الحال بالنسبة للعينات التي لا يكون فيها الفيروس وفيراً:
Goerzer, I., Buchta, C., Chiba, P., Benka, B., Camp, J. V., Holzmann, H., Puchhammer-Steckl, E., Aberle, S. W. (2020). النتائج الأولى لخطة وطنية لتقييم الجودة الخارجية للكشف عن تسلسلات جينوم سارس - CoV-2. مجلة علم الفيروسات السريرية: النشر الرسمي لجمعية عموم أمريكا لعلم الفيروسات السريرية، 129، 104537.لم يتم العثور على مرض سارس-COV-2 RNA في دم المرضى الذين يعانون من أعراض أعراض منخفضة، مما يجعل خطر تلوث نقل الدم لا يكاد يذكر.
كورمان، V.M.، رابيناو، H. F.، أدامز، O.، أوبير، د.، فونك، M.B.، كيلر- ستانيسلاوسكي، ب.، تيم، ج. ، دروستن، سيسيك، س. (2020). مرضى السارس-COV-2 الذين يعانون من أعراض وأعراض المرضى وخطر انتقال نقل الدم. نقل الدم، 60(6)، 1119-1122.دراسة ألمانية على 49 طفلاً تتراوح أعمارهم بين صفر و10 سنوات، و78 شخصاً تتراوح أعمارهم بين 11 و20 عاماً، وأكثر من 3000 شخص بالغ من جميع الأعمار، كلها كانت نتيجة إيجابية للفئات العمرية فيروس السارس-كوف-٢ التاجي كانون الثاني/يناير إلى نيسان/أبريل 2020. تحليل الحمل الفيروسي حسب عمر المرضى يكشف عن قيم مماثلة للشباب وعدم أعراض من لكبار السن والأعراض:
جونز، TC، Mhlemann، B، فيث، تي، بيلي، G، Zuchowski، M، هوفمان، J، شتاين، A، Edelmann، A، ماكس كورمان، الخامس، دروستن، C. تحليل السارس-CoV-2 الحمل الفيروسي حسب سن المريض. medRxiv 2020.06.08.20125484.